Rabu, 04 Mei 2011

Diskusi HPLC Shimadzu

Aq mw tya soal hplc shimadzu,...kolom q merck bru,wkt awal aq validasi bgus bget,tp td aq run bwt pct...masak flow 0.5 ml pres 100,pdhl pas pertama x aq pkai bth 1.5ml bwt dpt pres 100



  • Irving Widyawan pake gradien apa isokratik mbak?
    itu udah di cuci belum atau setelah jarak berapa jam itu?

    9 hours ago ·

  • Iyoh Zaki isokratik,aq nyuci nx air 1jam,metanol 1jam,bru kondisioning...kolom q phenomenex aja gk nyampai 1tahun buntu,apa hplc nx ya?
    9 hours ago ·

  • Irving Widyawan hmmm... hplc pake FRIT ga??? dulu aku yg hplc agilent 1100 di fakultas itu sempat ganti frit berkali2 karena emang sampel di proyek yg pernah kuikuti itu sampel manusia [darah, urin, sperma manusia 36 orang plus plus] coba tanyain ada frit nya ga...
    8 hours ago ·

  • Chrismawan Ardianto
    lho emang ada yang ga ada FRIT nya ya ving, perasaan mesti ada frit. n frit itu ga ada hubungannya ma sample, tapi sama partikel di eluen. klo bener masalah frit, coba cek air yg dipake, dah berapa hari ga diganti, kali aja dah butek dikit.... cara cek masalahnya, dilepas aja kolomnya, trus diflow, liat presurenya, klo nol berarti normal, klo sepuluh lebih ato malah 50 ya berarti saluran sebelum kolom ato termasuk fritnya perlu cek.

    8 hours ago ·

  • Chrismawan Ardianto
    lanjut; klo ternyata kolom dilepas, dan flownya nol alias normal, berarti masalah emang di kolom (MUNGKIN), atau pre kolom. coba cek spec-nya klo misal pake pre kolom, seingetku bisa di sonikasi. klo kolom ya alamat ngganti dah, kecuali mau... regenerasi kolom, pake flow gradual dr pelarut paling nonpolar, geser ke semipolar, campuran meOh-air, sampe ke polar trus mbalik lagi sampe ke nonpolar lagi, durasinya hmm biasanya aku 30-45 menitan/eluen terhitung pressure flat. agak troublesome sih tapi pernah berhasil. hemat kolom dah minimal 3-4 bulanan. sory ga bisa bantu banyak

    8 hours ago ·

  • Edy Purwanto ‎@Iyoh : Sepertinya penyaringannya kurang baik deh... udah pake filter 0,2 mikron (dulu pake 0,45 mikron) untuk penyaringan eluen and sampel? Ingatku bukan isokratik deh disana, udah gradient tapi operating system masih ikut HPLC, bukan ikut PC. PC hanya nampilin graphnya saja. Klo memang benar masalanya di air, sepertinya harus pake aqua bidestilata, bukan hanya aquadest apalagi cuman beli di brataco.
    8 hours ago ·

  • Edy Purwanto operator cukup analis.. tapi harus diperhatikan adalah bukan umur kolom yang setahun, tapi berapa jam kolom itu sudah digunakan dan bagaimana cara pembersihannya. Apalagi klo pake larutam buffer... Kalau perlu pembersihannya overnight (semalaman)
    8 hours ago ·

  • Chrismawan Ardianto
    weezzz.. setujuh..mas edi.. klo pake buffer emang rawan buntu klo ga dibilas aer banyak banyak.. soal air yg butek mesti dicek, itu mungkin aja sekalipun kita dah pake water pro HPLC, tapi coz dah dibuka plus apa lagi kena filter awal selan...g yang masuk ke botol eluen tuh ga pernah disonikasi ya.. partikel semacam mikroorganisme juga bisa mengganggu. so, meski air lang dipake pentadestilata (ga ada tuh) tetep penting u jaga kebersihan frit, filter selang eluen, lama dan jenis eluen pencuci kolom setiap hari (apa lagi tiap hari LC dimatiin).See More

    7 hours ago ·

  • Edy Purwanto Betul Chris ... harus sering2 dimasukkan ke ultrasonic biar pengotor2 kecil di prefilter HPLC bisa keluar..
    7 hours ago ·

  • Graha Wira Krida ooooooough.....
    • Iyoh Zaki TS,aq udah d dpn hplc dan dulu pernah kulakukan aliri tanpa kolom nol pres,skrang malah 10,
      Yesterday at 9:33am ·
    • Chrismawan Ardianto sip, klo bisa cek frit dulu.
      Yesterday at 10:05am ·
    • Bagoes Lanang
      Kalo cuman 10 itu gak signifikan.krn spt kt iyoh diatas,tekanan sampai meningkat 2xlipat.diantara sebab tekanan tinggi:viskositas fs.gerak tll tinggi,adanya kerak krn endapan garam di kolom,kontaminasi pd inlet kolom,jamur atau mikroba dlm ...kolom,kebuntuan frit pd inline filter atau guard column,kebuntuan frit pd inlet kolom,kebuntuan pd injektor.
      Mslh fase gerak,paling baik pakai hplc grade.kalo terpaksa,pake aquadest atau metanol pro analisis gpp,tp saring dulu pake saringan 0,45 mikron atau 0,22 mikron.
      Sangat penting mengetahui prosedur pencucian kolom yg baik,perawatan dan penyimpanannya.
      See More
      23 hours ago ·
    • Bagoes Lanang
      Kalo positip tekanan tinggi krn kolom buntu,coba lakukan regenerasi.namun perhatikan jenis silika kolom dan kepolaran analit yg diduga sbg pengotor kolom.kalo regenerasi kolom gagal,cara berikutnya adl buka head nut kolom kmd ultrasonik fri...tnya (mgkn kotor,namun resikonya silika pd ujung kolom akan mengelupas atau rontok shg menyebabkan void volume),cara ketiga adl cuci kolom melawan arah direction flow kolom alias membalik kolom.See More
      23 hours ago ·
    • Chrismawan Ardianto wah mantaps mas bagus, aku lali tentang cuci terbalik tuh. sip dah. tapi apa bener mas peningkatan 10 presure saat lepas kolom itu ga signifikan. bukannya umur fritnya dah waktunya ganti, ato klo ga eluennya perlu investigasi? maaf dah lupa.
      23 hours ago ·
    • Irving Widyawan jadi bener to kalo dari awal frit itu juga bisa jadi parameter kritis penunjuk... aku dulu setahun ganti frit 6 kali lho... gara2 sampel darah urin sperma manusia... ekstraksi udah pake nitrogen ampe kering... bis itu juga udah di larutin lagi dan udah disaring lagi... tetep aja frit jebol ampe 6 kali... kalo eluen metanol pro hplc...plus air dah ok juga kok... hehehe...
      23 hours ago ·
    • Irving Widyawan perasaan frit rusak udah sulit deh benerinnya... secara kena tekanan tinggi kotoran pasti mampat banget... ultrasonik dulu ga bisa atasi tekanan yg ga mau turun itu... baru di ganti frit langsung maknyos...
      23 hours ago ·
    • Chrismawan Ardianto irving : emang sampelmu kamu inject trus masuk lewat inletnya frit? kok bisa yaa..
      23 hours ago ·
    • Chrismawan Ardianto irving ; seingetku inlet yg ada fritnya itu untuk eluen yg dah di mix trus dipump ke arah valvenya injektor dan kolom. jadi ga pernah denger jenis sampel mempengaruhi kotornya frit. mohon koreksi.
      23 hours ago ·
    • Irving Widyawan perasaan dulu dibilangi pak Kus kalo eluen muter ambil dari rheodyne trus baru ke jalur semestinya masuk kolom deh... kan frit sebelum kolom... gitu kok alurnya... dulu juga pas di Berno juga gitu kok pas aku mulai mau dibukain hplc ama spv ku... dia juga gitu ceritanya...
      23 hours ago ·
    • Irving Widyawan hum.... dulu ngertiku gitu sih... kalo salah mohon koreksi ya TS sekalian... hehehehe...
      23 hours ago ·
    • Chrismawan Ardianto weh maap ping, saya yg salah. ternyata aplikasi frit yg dimaksud itu untuk inline kolom atau pre kolom ya.. hehehe baru nyadar abis baca comment mas bagus. sedang frit yg saya bahas itu frit eluen di dekat mixingpump sebelum ke injector valve, karena itu justru yg rawan penggantian. skali lagi maap.
      23 hours ago ·
    • Bagoes Lanang memang istilah frit digunakan utk membran filter yg ada di pre column (sebelum injektor), in line filter (setelah injektor), guard column dan head nut kolom.bahkan frit jg ada di check in dan check out valve pompa.
      22 hours ago ·
    • Bagoes Lanang penggantian frit tergantung pemakaian.umumnya paling cepat 6 bulan sekali.namun jika sampelnya kompleks kayak punya irving,bisa lebih cepat ganti.tekanan naik tanpa kolom berati ada penyumbatan pada frit.tp perlu diselidiki frit yang dimana.krn seperti saya bilang diatas,banyak letaknya 'frit'.
      22 hours ago ·
    • Chrismawan Ardianto maap kurang pengalaman, thx koreksinya mas bagus, frit sebelum injektor yg saya maksud (panjangnya kurang lebih 0.6cm). sedangkan guard column juga bisa disonikasi, tp klo head nut kolom fritnya di lepas dan di sonikasi apa pernah nyoba mas? bayanganku resiko void volume lebih kompleks ntar masalahnya. Iyoh Zaki : gimana ? dah ketemu biang keroknya?
      21 hours ago ·
    • Firdaus Candra Kurniawan mungkin aku bisa bantu mbak? wassup?
      18 hours ago via ·
    • Iyoh Zaki TS, biang kerok nx gk ktm,menrt q kolom gk masalah....coz kolom q bru...penyimpanan dan pencucian jg wes sesuai coa kolom,cman kok aneh nx bru 2x aq pakai udah bda bget kondisi,trus hplc q yg waters pressure nx 0 pas tanpa kolom,...untk sonikasi dah ta lakukan,metanol kan ya?
      15 hours ago ·
    • Bagoes Lanang maaf,iyoh.apanya yg kamu sonikasi?
      14 hours ago ·
    • Chrismawan Ardianto
      berat nih, hehehe.. menurutku mesti kembali lagi ke prinsipnya, baseline yang mestinya 100 pada flow 1 tercapai pada flow 0,5, artinya klo ga ada masalah sebelum kolom, ya berarti ada perubahan kondisi dikolom, entah karena ketiban barang r...usak dr supplier, ato ada kesalahan flushing atau penyimpanan, atau kebanting (hehehe yg ini masalah yg susah diinvestigasi). sekedar konfirmasi saja, bisa ga nyoba pasang kolom yg dulu sejarahnya pressurenya masih baik baik aja. klo ternyata OK pressurenya berarti memang positif mslh di kolom.See More
      14 hours ago ·
    • Chrismawan Ardianto weeee.. mas bagus bahaya tuh pertanyaannya, jangan jangan kolomnya disonikasi hehehe..
      14 hours ago ·
    • Chrismawan Ardianto Iyoh Zaki, sekarang ganti waters buat konfirmasi ya? gimana hasilnya..
      14 hours ago ·
    • Bagoes Lanang Makanya aku tny ke iyoh.apanya yg disonikasi?
      Namun kalo iyoh yakin kolom gak ada masalah,berarti ada mslh pd jalur sblm kolom.nah,diatas iyoh berkata kalo udah coba aliri tanpa kolom hasilnya tekanan=10.berarti jg gak ada mslh pd jalur sblm kolom.
      14 hours ago ·
    • Bagoes Lanang Satu lg pertnyaan.satuan yg terdisplay di layar pompa apa?bar atau kgf atau?krn beda.ada yg satuannya kalo dikonversi ke bar mk nilainya setengah atau 2x nya bar.krn hplc shimadzu satuan tekanannya bisa dirubah2.ok,iyoh.aku tunggu jwbmu dr 2 pertnyaanku.
      14 hours ago ·
    • Bagoes Lanang ‎@cisma:kamu dosen di bagian apa di fakultas?kok paham mslh hplc?
      14 hours ago ·
    • Chrismawan Ardianto yo cuman paham setitik be'e iso ngrewangi mas.. wong aku ki ra paham opo opo eee mas ilmune wis mabur hehehe
      14 hours ago ·
    • Chrismawan Ardianto hmm.. ada ya mas kgf?? baru tau aku.. mantap deh nambah isi utek.
      13 hours ago ·
    • Bagoes Lanang Ada 3 satuan yg bisa di-display ama layar pompa hplc shimadzu.kgf,bar,satunya lg aku lupa.bsk aku liat dulu hplc di lab-ku.kami pakai display bar.tp yg pasti,bar mirip dgn kgf.faktor perkaliannya mendekati 1.yg satu lg itu faktor perkaliannya agak jauh.
      13 hours ago · ·  1 personChrismawan Ardianto likes this.
    • Bagoes Lanang satuan tekanan yang lain adalah MPa.
      1 kgf/cm2=0,098 MPa.
      2 hours ago ·

    2 hours ago ·

3 komentar:

  1. Mau bertanya saya mahasiswa. Apa itu air pro KCKT trus untuk beli tersebut dimaa dan harganya berapa yah terimakasih

    BalasHapus
  2. Mas saya punx masalah hplc shimadzu jd kalau di buat analisa tiba - tiba tekanan turun sendiri itu kira2 apanx y yg bermasalah.... sampelku susu bubuk

    BalasHapus
  3. Bang mau tanya hplc ny pressure ny meningkat dari nol jadi 4900an.pompanya stop nggak bisa jalan krn tekanan sdh maksimal. Dengan laju alir berapapun masih nggak mau jalan dia.udah di buka kolomnya, tanpa kolom jg dia gak jalan. Tolong pencerahannya bang. Makasi

    BalasHapus